7º Fichamento. Questão 03 da Gincana de Genética

APLICAÇÕES DA BIOLOGIA MOLECULAR NA ODONTOLOGIA: CONCEITOS E TÉCNICAS


SILVA FB, SOUSA S MG, vol. 14 n.2 jul./dez. 2002

"Os avanços na biologia molecular têm contribuído significativamente para o entendimento da etiologia das doenças humanas, também vem apresentando aplicação bastante expressiva na pesquisa de marcadores genéticos úteis no diagnóstico laboratorial e na avaliação da predisposição a inúmeras doenças. Na área odontológica tem proporcionado o diagnóstico precoce da cárie dental, da doença periodontal e do câncer bucal."
"Os cromossomos são estruturas responsáveis pelo armazenamento, duplicação e transmissão de material genético. O ser humano possui 23 pares de cromossomos de tamanhos e formas diferentes. O DNA é um polímero formado por nucleotídeos. As bases nitrogenadas podem ser de dois tipos: pirimidínicas e púricas. Para o DNA ser comprimido dentro do núcleo celular, ele é helicoidizado em diversos níveis. O RNA é composto por uma única cadeia de nucleotídeos. Existem três tipos: mensageiro, ribossômico e transportador. A síntese de proteínas é ativada quando uma proteína torna-se necessária ao metabolismo celular. Para iniciar a síntese, a seqüência de DNA que contém o gene específico para determinada proteína deve estar com as pontes de hidrogênio rompidas entre as bases e a dupla hélice desenrolada. "
"A análise molecular é um novo método de avaliação que busca as alterações expressas em nível genético, ou seja, pelo DNA. Para extrair o DNA do núcleo celular, são necessárias várias etapas, que compreendem lise celular, extração das proteínas e do RNA, precipitação do DNA, até a purificação. A eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida é um método simples e rápido que separa o DNA em fragmentos de tamanhos diferentes usando enzimas de restrição. MÉTODOS: MÉTODO DE SOUTHERN - Depois de obtidos os fragmentos de DNA no gel, um certo segmento do DNA que contém o gene de interesse pode ser detectado pela hibridização com uma sonda específica. Para isso, o DNA contido no gel é transferido para um filtro de nitrocelulose ou náilon por meio do método de transferência chamado Southern blotting; HIBRIDIZAÇÃO COM OLIGONUCLEOTÍDEOS ALELOESPECÍFICOS - reconhecimento de um alelo particular usando-se diferentes sondas; REAÇÃO EM CADEIA DE POLIMERASE - amplificação enzimática específica do DNA visando à produção de milhões de cópias dessa seqüência em um tubo de ensaio. HIBRIDIZAÇÃO IN SITU DE FLUORESCÊNCIA - utiliza-se uma preparação de cromossomos metafásicos em lâmina, na qual o DNA cromossômico foi desnaturado pela exposição a formamida antes da hibridização, com uma sonda apropriada"
"A microbiologia bucal é essencial para a identificação e caracterização de vários microrganismos envolvidos nas infecções bucais. Muitos métodos têm sido usados na detecção da variação fenotípica e genotípica para a caracterização de patógenos periodontais, assim como na identificação de bactérias da cavidade bucal. Na terapia endodôntica, os profissionais serão capazes de desenvolver geneticamente tecido pulpar dentro do canal para crescer e preencher a câmara. Os genes supressores tumorais têm a propriedade de bloquear a proliferação celular descontrolada. Tem sido evidenciado que genes específicos estão alterados no câncer bucal. Acredita-se que o mapeamento do genoma e a clonagem de genes para síndromes de câncer fornecerão informações importantes a respeito dos mecanismos de carcinogênese e dos processos biológicos fundamentais. Atualmente, os patologistas têm dado maior importância à identificação da apoptose e da mitose para poderem melhor compreender a cinética e o desenvolvimento de diversos processos patológicos. Os carcinomas espinocelulares na cavidade bucal constituem a maior proporção de cânceres de cabeça e pescoço e umas das principais causas de morbidade e mortalidade mundial."